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Diciembre 2009, Vol. 22(4): 173-227
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Abstract (EN)
The aim of the study was to explore the structure and growth dynamics of Staphylococcus aureus resistant to methicillin (MRSA) colonies using semithin sections visualized by light microscope. One S. aureus susceptible to methicillin (MSSA) and one MRSA clinical strains were studied. Colonies in agar plates were embedded in epoxy resin after each incubation period (24 h and 48 h) at 37ºC. Semithin sections of 0.5µm were stained with toluidine blue and visualized by light microscope. Microscopically, no structural differences were observed between SASM and SARM colonies but differences were observed in both strains between 24 and 48 h incubation periods. Colonies showed two layers clearly differentiated at24 h independently of the resistance to methicillin: (A) one basal layer with high density of population in contact with culture media, and (B) one superficial layer with a lower density of population. Colonies showed four layers at 48 h:(A) one basal layer with high density of population; (B) one clear layer constituted by very degraded bacterial remains in which can be observed cocci dispersed with their dyeing properties; (C) one mixed layer constituted by viable bacteria and little degraded bacterial remains (D) one superficial layer with a lower density of population than basal layer. Colonial architecture is a complex and time-dependent process.
Abstract (ES)
El objetivo del estudio fue observar la estructura colonial y la dinámica del crecimiento de Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) empleando cortes semifinos visualizados al microscopio óptico. Se estudiaron una cepa de S. aureus sensible a meticilina (SASM) y un SARM. Después de cada periodo de incubación (24 y 48 h) a 37ºC las colonias fueron incluidas en una resina epoxi. Cortes semifinos de 0.5 µm fueron teñidos con azul de toluidina y visualizados al microscopio. Desde el punto de vista microscópico, no se observaron diferencias estructurales entre las colonias de SASM y SARM. Si se observaron diferencias en ambas cepas entre las colonias de 24 y 48 h de incubación. En las colonias de 24 h se observaron 2 capas claramente diferenciadas: (A) una capa basal con alta densidad de población en contacto con el medio de cultivo y (B) una capa superficial con menor densidad de población. En las colonias de 48 h se observaron cuatro capas: (A) una capa basal con alta densidad de población; (B) una capa clara constituida por restos bacterianos muy degradados en cuyo seno se observan muy escasos y dispersos cocos que conservan sus propiedades tintoriales; (C) una capa mixta, constituida por una mezcla de bacterias vivas y restos bacterianos muy groseros y poco degradados y (D) una capa superficial con menor densidad de población que la capa basal. Las colonias forman estructuras altamente organizadas originadas por la disponibilidad de nutrientes y mecanismos de comunicación intercelular. La arquitectura colonial es un proceso complejo y tiempo dependiente.
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