Evaluación de mutaciones que confieren resistencia a análogos de nucleósidos e inhibidores de la proteasa en pacientes infectados por el VIH-1

Evaluación de mutaciones que confieren resistencia a análogos de nucleósidos e inhibidores de la proteasa en pacientes infectados por el VIH-1 G. Martínez, L. Sarría, C. Campelo, A. Merchán, R. Cisterna y Grupo de Estudio de Resistencias a Antirretrovirales Departamento de Inmunología, Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina y Odontología de la Universidad del País Vasco, Bilbao. RESUMEN Se evaluó la presencia de genotipos que confieren resistencia a los inhibidores de la transcriptasa inversa y a inhibidores de la proteasa en el DNA proviral obtenido de células mononucleares de sangre periférica. Se estudiaron 53 pacientes infectados por el VIH-1, de los cuales 19 no habían recibido tratamiento antirretroviral previo. De los 34 restantes, 9 habían sido tratados con combinaciones de dos inhibidores de la transcriptasa inversa (AZT, ddI, d4T, 3TC) y 25 habían recibido terapia triple antirretroviral incluyendo un inhibidor de la proteasa (nelfinavir, indinavir, saquinavir, ritonavir). Para determinar la presencia de mutaciones genotípicas que confieren resistencia a los inhibidores de la transcriptasa inversa se puso a punto un ensayo de hibridación en placa Microtiter. Se detectaron mutaciones tanto en pacientes tratados como sin tratamiento antirretroviral previo, siendo las más frecuentes las que confieren resistencia a AZT, seguidas de las que producen resistencia cruzada a ddI/ddC y 3TC, coincidiendo con los fármacos de uso más frecuente hasta el momento. Solamente en 13 casos no se detectaron mutaciones que confirieran resistencia frente a ningún análogo de nucleósido analizado. Para el análisis de las mutaciones en el gen de la proteasa se realizó una hibridación por dot-blot que incluyó las mutaciones localizadas en los codones 36, 82 y 90. La mutación 82 se detectó en un solo paciente. Por lo tanto, y con el fin de poder determinar el perfil de resistencias genotípicas en pacientes infectados por el VIH-1 a la hora de realizar una mejor elección terapéutica, sería recomendable considerar pruebas de análisis de resistencia genotípica frente a los fármacos de uso clínico. Palabras clave: VIH-1 - Transcriptasa inversa - Proteasa - Antirretrovirales - Resistencia Evaluation of mutations that confer resistance to nucleoside analogs and protease inhibitors in HIV-1-infected patients SUMMARY Genotypes that confer drug resistance to reverse transcriptase inhibitors and protease inhibitors were evaluated in HIV-1 proviral DNA obtained from peripheral blood mononuclear cell samples. Fifty-three HIV-1-infected patients were studied, 19 of whom had not received antiretroviral treatment. In the other 34 patients, 9 had been treated with combinations of two reverse transcriptase inhibitors (AZT, ddI, d4T, 3TC) and 25 had been treated with triple antiretroviral therapy including a protease inhibitor (nelfinavir, indinavir, saquinavir, ritonavir). To determine the presence of mutations involved in the development of resistance to reverse transcriptase inhibitors a hybridization Microtiter assay was carried out. Mutations were detected in treated patients as well as in those without previous antiretroviral treatment, with the most frequent mutations being those that confer resistance to AZT, followed by those that develop cross-resistance to ddI/ddC and 3TC, which are the most commonly used drugs to date. No mutations were detected to any nucleoside analog in only 13 cases. To analyze the presence of mutations in the protease gene a dot-blot hybridization was carried out which included the mutations in codons 36, 82 and 90. Mutation 82 was detected in one case. Therefore, with the aim of determining the pattern of genotypic mutations in patients infected with HIV-1 and in order to make the best therapeutic choice, it would be recommended to consider carrying out genotypic resistance assays in clinical practice. Key words: HIV-1 - Reverse transcriptase - Protease - Antiretroviral drugs - Resistance

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