Sensibilidad in vitro de citomegalovirus al ganciclovir y al foscarnet

RESUMEN

El antivírico de elección en el tratamiento de las infecciones graves causadas por citomegalovirus es el ganciclovir, un análogo del nucleósido de guanina que precisa ser fosforilado a la forma ganciclovir trifosfato para actuar como antivírico. En los casos en que por alguna razón el ganciclovir no sea el tratamiento de elección, la alternativa terapéutica es el foscarnet, que se engloba en el grupo de los análogos del pirofosfato. En pacientes con sida y otras inmunodeficiencias se ha descrito enfermedad por citomegalovirus resistente al tratamiento con ganciclovir o foscarnet. Los objetivos de este trabajo han sido la puesta a punto de la técnica de reducción del número de placas para el estudio de la sensibilidad in vitro al ganciclovir y al foscarnet, y su aplicación para el conocimiento de los valores de sensibilidad in vitro de los citomegalovirus aislados de muestras clínicas. Se estudiaron 80 cepas de citomegalovirus obtenidas de pacientes que no habían recibido tratamiento previo. La realización de la técnica requirió entre seis y ocho semanas. Los resultados se han expresado como DI₅₀ (dosis inhibitoria 50) y los valores para el ganciclovir se han situado entre 2,14 y 13,49 µM. En 78 cepas (98%) la DI₅₀ del ganciclovir fue inferior a 12 µM. Para el foscarnet los valores de DI₅₀ se han situado entre 46,65 y 460,22 µM. En 78 cepas (98%) la DI₅₀ del foscarnet fue inferior a 400 µM. En dos cepas la DI₅₀ del ganciclovir fue superior a 12 µM, y en ellas el estudio molecular de su DNA no mostró ninguna mutación del gen UL97. En otras dos cepas la DI₅₀ del foscarnet fue superior a 400 µM. En resumen, la frecuencia de cepas de citomegalovirus resistentes in vitro al ganciclovir y al foscarnet en pacientes no tratados previamente ha sido baja, y cuando ha existido no ha sido indicativa de fallo terapéutico puesto que los pacientes de que se aislaron evolucionaron favorablemente.

Palabras clave: Citomegalovirus - Antivírico - Ganciclovir - Foscarnet - Sensibilidad - Resistencia - DI₅₀

In vitro susceptibility to ganciclovir and foscarnet of cytomegaloviruses

SUMMARY

Ganciclovir is the drug of choice for the treatment of acute cytomegalovirus infections. This antiviral agent is a nucleoside analog of guanine whose activity is dependent upon its intracellular phosphorylation to the triphosphate derivative. Foscarnet is used to treat immunosuppressed patients such as organ transplant recipients and AIDS patients with cytomegalovirus who do not tolerate or develop resistance to ganciclovir. Foscarnet is a pyrophosphate analog that directly inhibits viral DNA polymerase. Resistant isolates have been recovered from immunocompromised patients treated with both anticytomegalovirus compounds. The aims of this study were to prepare a plaque reduction assay to study the in vitro susceptibility of cytomegalovirus to ganciclovir and foscarnet, and to apply it to the knowledge of in vitro susceptibility values of cytomegalovirus isolated from clinical samples. Eighty isolates from patients who had never been treated with ganciclovir or foscarnet were tested for antiviral susceptibility. The plaque reduction assay took 6-8 weeks. The results are expressed as ID₅₀ (inhibitory dose 50), and the ID₅₀ values of ganciclovir were between 2.14 and 13.49 µM. The ID₅₀ for ganciclovir was higher that 12 µM in only two cases (2%). The molecular study of the DNA of these did not show any mutation in the UL97 gene. The ID₅₀ values of foscarnet were between 46.65 and 460.22 µM. In 78 cases (98%) foscarnet ID₅₀ was lower than 400 µM. These results were comparable with those obtained by other authors. To summarize, the frequency of cytomegalovirus strains resistant in vitro to ganciclovir and foscarnet in previously untreated patients was low and when it was present it did not involve therapeutic failure since the patients progressed favorably..

Key words: Cytomegalovirus - Antiviral - Ganciclovir - Foscarnet - Susceptibility - Resistance - ID₅₀