Sensibilidad in vitro de hongos dematiáceos a los antifúngicos utilizando E-test®

Sensibilidad in vitro de hongos dematiáceos a los antifúngicos utilizando E-test^®

J.R. Cermeño Vivas¹ y J.M. Torres-Rodríguez^2
1Departamento de Parasitología y Microbiología, Escuela de Medicina, Universidad de Oriente, Ciudad Bolívar, Venezuela;
²Grup de Micologia Experimental i Clínica (GREMEC), Institut Municipal d'Investigació Mèdica/Institut Municipal d'Asistència Sanitària, Universitat Autònoma de Barcelona, Barcelona, España

RESUMEN

Se ha determinado la concentración mínima inhibitoria (CMI) mediante E-test^® en 52 aislamientos de hongos filamentosos dematiáceos pertenecientes a 17 especies. Se han utilizado los cinco antifúngicos sistémicos disponibles comercialmente: amfotericina B, 5-fluorocitosina, ketoconazol, fluconazol e itraconazol. Se ha utilizado el método recomendado por los fabricantes, con la excepción de la preparación del inóculo, que para que fuera más preciso se ha estandarizado por espectrofotometría hasta obtener 1 a 5 ´ 10⁶ UFC/ml. Todas las cepas fueron sembradas simultáneamente en dos medios de cultivo: agar casitona y agar RPMI 1640. El crecimiento de casi todos los aislamientos fue evidente a partir de las 96 horas de incubación. El 55,8% de las cepas presentaron una CMI £2 mg/l para la amfotericina B y el 98% una CMI de 32 mg/l para la 5-fluorocitosina. Todas las especies mostraron valores bajos de CMI para el itraconazol y el ketoconazol, con una media geométrica de 0,19 y 0,26 mg/l, respectivamente. Excepto una cepa, con CMI de 8 mg/l, el resto presentaron valores ±256 mg/l para el fluconazol. No se encontraron diferencias en los valores de las CMI para ambos medios de cultivo y la reproducibilidad fue del 100%; no obstante, la lectura de las CMI resultó más fácil con el agar casitona debido a un mejor contraste de la elipse de inhibición. Estos resultados ugieren que el itraconazol y el ketoconazol podrían ser los antifúngicos de primera elección en el tratamiento de las infecciones producidas por las especies evaluadas. Se considera que el E-test^® es una prueba adecuada para determinar la sensibilidad in vitro a los antifúngicos en hongos filamentosos dematiáceos.

Palabras clave: E-test^® - Hongos dematiáceos - Sensibilidad in vitro - Antifúngicos

Antifungal susceptibility of dematiaceous filamentous fungi using the E-test^®

SUMMARY

The usefulness of the E-test^® has been studied to determine the in vitro susceptibility of 52 isolates of 17 species to five antifungal drugs: amphotericin B, 5-flucytosine, ketoconazole, itraconazole and fluconazole. Minimal inhibitory concentrations were determined following the manufacturers' instructions, except in the preparation of the inoculum. In this case a spectrophotometric method was used to obtain 1-5 ´ 10⁶ CFU/ml. Two different culture media were included: casitone-agar and RPMI 1640 agar. Most isolates showed clear growth in both media after 96 h of incubation at 37 ºC. The species showed low MIC concentrations to ketoconazole and itraconazole. Only 55.8% of isolates showed MICs £2 mg/l to amphotericin B and 98% of strains presented MICs of 32 mg/l for 5-flucytosine. With the exception of one isolate, the remaining were resistant to fluconazole with MIC values 256 mg/l. No differences were found between the MICs for the two media, but values were easier to read in casitone-agar. These results suggest that itraconazole and ketoconazole should be the antifungals of first choice for treating infections due to the evaluated species. This study showed that the E-test^® appears to be a suitable method for testing the susceptibility of dematiaceous filamentous fungi to antifungals.

Key words: Urinary tract infection - Uropathogens - Antibiotics - Children